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第10章 花卉管理与新技术(4)

营养元素在养花容器内会逐渐氧化,酸碱度也会失去平衡,应及时更换。注意更换时必须用清水把栽培基质彻底冲洗干净,再注入加水稀释后的新营养液,否则水的浓度会越来越高。

组织培养有哪些优越性

组织培养又叫无菌培养或离体培养,是应用无菌操作技术,培养植物的离体器官、组织或细胞,如如茎尖、芽尖、根尖、胚芽等,使其在人工控制的条件下进行生长和发育的新技术。

此法是进行植物快速繁殖和保存种质材料以及培育无病毒苗的一种方法,是一种先进的植物繁殖技术。那么,具体地说,用在花卉的繁殖上具有哪些优越性呢?

对于优良品种的繁殖。

事实上,很多花卉在繁殖的过程中,很容易发生变异,失去了原有品种的优良特性,而采用组织培养,可保存种子性能,保持原有品种的固有性状和特性。

取得花卉新品种。

组培是一种在器官、组织和细胞水平上的育种方法,具有变异大、机遇多、条件容易控制等特点。利用这种新技术可以加速新品种的育种工作。

例如,通过组培技术进行杂种胚培养,利用花药和花粉培养等,从而大大缩短了育种的年限,使其顺利生长,促进远缘杂交育种的进行。然后,从中可从中选育出优良的新品种。

繁殖速度快。

就一般花卉而言,不论是播种、扦插、分株等都较费时、费力,而组织培养能节约繁殖材料,只需要从优良母株上采集一小部分营养器官,在合适的条件下经过离体培养,一年内就能繁殖出大量花苗。

节省栽培工具和空间。

利用三角瓶或试管进行组织培养,可节省很多的空间,通常在一小间培养室内,就可以繁殖出几万株苗。

不受自然环境的影响。

一般栽培花卉要考虑很多环境的因素,如光照、温度、水分等,如不适宜,还会降低花卉的繁殖率,而采用组织培养繁殖,全年均可连续培养,不受自然环境的影响。

防止品种退化。

对于长期使用无性繁殖,并开始退化的花卉品种,可选择组培方法繁殖,这样可使个体发育向年轻阶段转化,防止品种退化。

提高繁殖较困难花木的繁殖率。

对一些生产上难以进行无性繁殖的花木,或者至今完全不能进行无性繁殖的花木,在组培的特殊条件下,可以在短期内获得大量营养苗,从而使花卉的繁殖率大大提高。

获得无病毒花苗。

无性繁殖时病毒可通过营养体进行传播渗透,在母株内逐代积累,故为害也逐代严重。其突出特征是生长衰弱,花朵变少、变小。如果采用组织培养,病毒无法输送进去,以后长成的植株即为无病毒植株。

将无病毒植株再通过组培繁殖,即可得到大量无病毒花苗。因而这种脱毒技术是获得花卉无病毒苗的重要途径。目前中国已在唐菖蒲、大丽花、水仙、兰花、菊花、百合、香石竹、矮牵牛、鸢尾等许多种花卉上应用这种脱毒技术。

组织培养需要哪些设备

使用组织培养技术繁殖花木,对于栽培的设备要求很严格。具体地说,包括以下几个方面的内容。

培养室。

培养室作为培植花卉的场所,是组织培养设备中最为重要的部分。培养室内要求清洁、干燥、保温性能好,但是面积不宜过大。另外,室内要安装多层架子,供不同种类的花卉编号使用。架子上方安装有日光灯照明,并装有空气调节器控制温度。

化学实验室。

化学实验室内需设置高压灭菌锅、分析天平、普通天平、酸度计、重蒸馏水蒸馏器、烘箱、冰箱、显微镜等仪器设备。

接种室。

接种室应紧靠培养室,内设超净工作台、安装紫外灯。如果没有接种室,使用无菌接种箱也可以替代。

此外,常备用具还包括大量试管、三角瓶、容量瓶、烧杯、量筒等玻璃器皿以及镊子、小型剪刀、解剖刀、接种针等。

如何降低组培苗的成本

组织培养需要许多设备条件,使用成本较高。那么,如何降低成本,而不影响使用的效率呢?具体内容包括以下几个方面。

用自然光代替人工灯光。

我们知道无论在实验室内还是培养室内,都需要大量的光照条件。同时每年约有半年以上时间需要用空调机降温,因此耗电量很大,并加大了设备投资。为了节约成本,用自然光代替人工灯光是完全可以的。

具体方法是,利用落地大的玻璃窗户,在距窗1.5米左右的光强度,可超过日光灯下的强度。这样白天光合作用强、温度高,晚上呼吸作用低,消耗少,和光照强弱相一致,这样有利试管苗的培植。实践证明,在温度适宜的情况下,用自然光培养比人工光照生长得还好。

减少污染。

减少接种室和培养室霉菌的污染,加速花卉的增殖,也是减少成本的一项重要措施。这就要求在使用的时候及时消毒灭菌,保持室内干燥,保持高度清洁。接种过程中防止灰尘及病菌孢子等进入培养瓶内。

培养基的重复利用。

常规培养一般培植1个月左右就要倒掉,为减少培养基的消耗,节省培养基成本,可以进行回收再利用。但要注意,对于已经污染的培养基,一般不宜再用。具体方法是:

把用过的培养基集中倒在一起,充分煮开后再定容到原来的量。由于在此过程中会对培养基有部分的消耗,因此,需要将这些营养加以补充。

一般的说,需要再加入原来培养基的1/4,这样就不需要再加其他物质,如糖及琼脂。另外,pH要重新调整到需要的酸碱度,最后分别装入培养瓶进行高压灭菌,即可再用。

组织培养分为哪些步骤

组织培养需要经过下列步骤。

器具的消毒。

进行组织培养,一定要做好消毒工作。接种室和超净工作台用70%酒精擦洗,并用紫外光照射。一些用具如玻璃器皿等,要用洗衣粉刷洗干净,并进行高温消毒。

培养材料的采集。

进行组织培养的取才很广泛,如根、茎、叶、花、芽及种子的子叶,甚至也可利用花粉等,但通常多取初生幼嫩的材料。不论是选取的哪一部,在移入培养基时都必须保持其鲜嫩状态,否则组织培养将会失败。

培养材料的消毒。

要想组织培养能获得成功,还必须对进行组织培养的材料进行适当的处理。先将采集来的材料用自来水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗2~3遍,然后用无菌纱布将材料上的水分吸干,在将其切成小块,放入70%酒精中浸泡15~30秒,然后用30%漂白粉澄清液浸泡20分钟消毒,最后用无菌水冲洗3~5遍,使之彻底消毒灭菌。

制备外植体。

进行组织培养的材料经过消毒灭菌后,需要将其制成外植体。也就是用消过毒的刀、剪或镊等,在消毒滤纸上剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等,然后将其切成长0.2~0.5厘米的小片即可。在操作过程中,严禁用手触动这些材料。

接种培养。

外植体制备好后,应在无菌条件下,将切好的外植体立即接种在培养基上。接种后所用试管和三角瓶都要用无菌药棉封口,放培养室培养架上培养。

培养架可用木制或铁制的,架长1.2米左右,与40瓦日光灯管长一致,宽80~90厘米。一般分为4~5层,每层高40~50厘米,日光灯装在上方,每一层可装两支日光灯。

照度为2000~2500勒克斯。每天日光灯照明12~16小时。温度大多采用日夜恒温培养,以保持在25℃±20℃。也可采用变温培养,夜间温度略低于白天。

怎样提高组培苗的成活率

组织培养成功与否,关键因素有3个:一是要选用适合外植体的培养基;二是要适期移栽;三是要做好移栽后的养护工作。

当试管苗在生根培养基中长出1~5条白色的根,根逐渐伸长并长出侧根和根毛,且具有3~5个叶片和一个顶芽时,移栽小苗最好。通常春季移栽比夏季移栽成活率要高。

小苗出瓶前,需先打开瓶盖1~3天,提高小苗对病菌和外界环境中各种不良因素的抵抗能力。但时间不宜过长,否则培养基易污染生霉,造成小苗腐烂死亡。

出瓶时,要用镊子轻轻取出小苗,用力不可过猛,否则易损伤小苗茎部和根部。取出后,用温水轻轻将根部残存的培养基洗净,以免引起微生物滋生,导致根腐或茎腐。

移栽小苗,宜选用通透性好、排水力强的疏松土壤,一般以沙土与蛭石各半为好。移栽前将土压平,用细孔喷雾器喷两次水,使土壤湿透,待水渗下后再进行移植。栽入小苗时,先在土壤上扎一个小穴,再将小苗放入栽好。

移栽后,采用浸盆法浇水,并保持较高的空气湿度。开始几天空气相对湿度宜保持在90%以上,并将花盆罩上塑料薄膜罩,上开几个小孔,以利通风,1周后再去掉薄膜罩。

刚移栽的试管苗,在10天之内要注意遮阳,并每隔1~2天用浸水法浇灌一次营养液。当小苗逐渐适应了新环境,2~3周后可移到室外,放置在散射光处,以后逐渐增加光照。在室外经过1~2周之后再分栽上盆。

近年来,一些花卉组培试管苗,并不在试管中诱导生根,而是将愈合组织分化的小植株直接扦插到消过毒的插床内,采用间歇喷雾法,在保持适当温、湿度的条件下促其生根。这样处理的试管苗生长健壮,移植到花盆时均已形成良好的根系,有利于幼苗的成活和生长。

选择和配制培养基

培养基主要是由水(通常用重蒸馏水)、大量元素、微量元素、维生素、生长调节物质、蔗糖、琼脂等组成。它们都是供植物细胞、组织、器官再生时所必需的营养物质。

培养基的种类很多,常用的有MS、ER、B5、SH、HE等5种。一般应根据不同的植物和不同的培养部位以及不同的培养目的来选择合适的培养基。

最常用的是MS培养基,它包含的营养成分比较全面,适合一般花卉生长。1升MS培养基中,含硝酸铵1.65克、硝酸钾1.6克、氯化钙0.44克、硫酸镁0.37克、磷酸二氢钾0.17克、碘化钾0.83毫克、硼酸5.2毫克、硫酸锰22.3毫克、硫酸锌3.6毫克、钼酸钠0.25毫克、硫酸铜0.025毫克、氯化钴0.025毫克、硫酸铁27.8毫克、蔗糖30克、琼脂7克。

另外,还含有一定量的激素,具体的量应根据花卉的种类和培养目的而定。如果是大量生产,可用自来水代替重蒸馏水,用普通白糖代替分析纯蔗糖,以降低成本。

配制培养基时,先在量筒内放少量50℃左右的蒸馏水,再逐个投药,待一种药剂溶化后再放另一种药剂,药剂全部溶化后,根据需要再加入一定量的生长调节物质,然后补充蒸馏水至l升,最后加入加热熔化好的琼脂。

为了达到培养基的酸碱度要求,配好的培养基还要用1摩尔的NaOH调整pH(即称取40克NaOH溶于1升蒸馏水中,混匀即可)。调整时用酸度计或精密试纸测定,一般保持pH5.4~5.8较好。

调好酸碱度后趁热分装试管或三角瓶中,盖好棉塞,做上标记。待琼脂冷凝后再用牛皮纸包扎,然后放入高压锅中灭菌,以防腐败变质,并可放于培养室预培养3天,如果没有杂菌污染则可取花卉材料进行接种。

为了减少工作量,可预先配成比1升所需浓度高10~100倍的母液,将其放入冰箱中贮藏。配制1升培养基时只需量取1/100~1/10的母液进行稀释即可。

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