一、目的要求
1.学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。
2.初步了解放线菌的形态特征。
二、技能目标
1.会用扦片法进行放线菌的观察。
2.能对放线菌进行鉴别。
三、基本原理
放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性菌。广泛分布于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。放线菌的菌落形态特征为：形成干燥、不透明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉”的菌落。菌落与培养基连接紧密，难以挑取，菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平板上有变形的现象，有泥腥味。菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基表面的气生菌丝。
四、试剂和器材
1.菌种：细黄链霉菌、青色链霉菌、弗氏链霉菌。
2.培养基：灭菌的高氏Ⅰ号琼脂培养基。
3.仪器或其他用具：平皿、玻璃纸、盖玻片、玻璃涂棒、载玻片、接种环、接种铲、镊子、石炭酸复红染液、显微镜等。
五、操作步骤
1.扦片法：在高氏Ⅰ号琼脂平板上划线接种，以无菌操作将灭菌的盖玻片以45°扦入琼脂内，倒置28℃培养3～5d 后直接镜检。（观察时用暗光，先低倍镜后高倍镜，用0.1％美蓝染色观察，效果更佳）2.玻璃纸法：将已灭菌的玻璃纸片铺在培养基平板上，压平玻璃纸后接种，倒置28℃培养3～5d后直接镜检。
3.印片法：用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基切下一小块，菌面朝上放在一载玻片上。另取一洁净载玻片置火焰上微热后，盖在菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢丝或孢子）黏附在后一块载玻片中央，有印迹的一面朝上，通过火焰2～3次固定，火焰固定后再用石炭酸复红染色液染色1min，镜检。
附：放线菌形态观察实训报告
实训名称：放线菌形态观察
姓名学号
专业班级
实训地点实训日期
一、实训目的
二、实训原理
三、实训材料
四、实训步骤
五、实训结果及分析
绘出青色链霉菌、弗氏链霉菌的形态图并进行描述。
菌名： 菌名：
放大倍数： 放大倍数：
特殊结构： 特殊结构：
六、问题与思考
1.试比较三种培养和观察放线菌方法的优缺点。
2.玻璃纸培养和观察法是否还可用于其他类群微生物的培养和观察？为什么？
3.镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？
