一、外植体的选择与消毒
选取生长健壮、无病虫害的母株为试验材料，非洲菊以幼芽茎段作外植体。从根颈部切取0.1cm～0.3cm带幼芽茎段，饱和洗衣粉水刷洗，然后用自来水冲洗2h，在超净工作台上，将其放入广口瓶中，70%酒精消毒5s，再用0.1%氯化汞溶液消毒5min～8min，无菌水冲洗3次～4次后备用。
二、培养条件
1.诱导与分化培养
在超净工作台上将消毒处理之后的外植体接种在准备好的外植体诱导培养基中，培养条件控制在温度25℃±2℃，光照时间12h/d～14h/d，光照强度120μmol·m-2·s-1～200μmol·m-2·s-1，继代周期30d，其培养基分别如下：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L（外植体诱导培养基），MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L（增殖培养基），MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L（壮苗培养基），以上培养基如无特别说明，其蔗糖浓度均为3%，琼脂浓度0.6%，pH值5.8～6.0。
2.生根培养
当不定芽长至2cm～3cm时，将其转入生根培养基中进行生根培养，其培养条件控制在温度25℃±2℃，光照时间12h/d～14h/d，光照强度120μmol·m-2·s-1～200μmol·m-2·s-1，其生根培养基如下：1/2MS+IBA0.5mg/L，如无特别说明，1/2MS培养基仅为大量元素减半，其蔗糖浓度均为1.5%，琼脂浓度0.6%，pH值5.8～6.0。
三、试管苗移栽
当株高长至2.5cm～3.5cm，根长为2cm左右，粗壮且具较多白色根毛时进行试管苗的移栽。移栽前，打开培养瓶盖，将瓶苗置于温室炼苗6d～7d后，然后用镊子小心取出试管苗，洗净根部琼脂，用800倍代森锰锌溶液浸泡1min～2min，根部蘸适当浓度的生根剂，移栽于上层为3cm厚纯净河沙，下层为草炭∶蛭石∶珍珠岩=5∶3∶2的基质中，移栽后每7d喷洒多菌灵灭菌，相对湿度保持在70%～80%，温度控制在22℃±2℃。
【思考题】
1.设计非洲菊组织培养采用叶片作为外植体取材部位的试验方案。
2.愈伤组织的概念是什么？
3.再分化和脱分化有什么区别？
