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第52章 如何从蛋壳膜中提取溶菌酶

溶菌酶是一种国内外紧缺的生物活性物质,在生物工程、临床医药、食品等行业有广泛用途。

(1)收集蛋壳膜。拣去杂质后,以每千克蛋壳加3千克水的量,一边搅拌一边加入200毫升浓盐酸(12摩尔/升),室温下浸泡80分钟,使壳、膜分离,然后倒出酸液,收集蛋壳膜。

(2)蛋壳膜的处理。将收集到的蛋壳膜,拣去杂质后,用清水洗至中性,然后用剪刀将其剪成碎片并放入容器中。按蛋壳膜质量的1.2倍,向容器中加入0.5%的氢氧化钠溶液,搅拌5~10分钟。搅拌结束后加入盐酸,调pH值至6.0。然后边搅拌边加热,温度到40℃时再搅拌45分钟后,即可进行过滤。

(3)去除卵蛋白。将上述过滤的溶液,水浴加热至80℃,冷却后加醋酸适量,调pH值至4.6,再用离心机离心,取上清液备用。

(4)提取溶菌酶。上清液用20%的氢氧化钠溶液调pH值至6.0,然后边搅拌边加入5%的聚丙烯酸,将pH值调至3.0,静置30分钟后,倒去上清液。在沉淀的凝聚物中加入碳酸钠溶液,调pH值至9.5,使凝聚物溶解,然后加入0.5%的氯化钠溶液,使溶菌酶从凝聚物中解离下来,并用离心机进行分离。

(5)制取溶菌酶结晶。将离心所得的上清液收集静置后,会有溶菌酶结晶析出。经过滤和真空干燥后,就可以得到溶菌酶成品。

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